无血清培养基的研发
研制针对特殊细胞系或原代培养的无血清培养基主要有两种方法.种方法是找到一个相关细胞类型的培养基已知配方,加入或不加10%~20%的透析血清,在减少血清的同时,逐一或成组的改变培养基成分直到培养基达到你所特殊需要的理想条件.这种方法初由Ham及其同事[Ham,1984]采用,通常能提供理想培养条件.如果发现一组成分对血清的减少起到补充的作用,那就通过单种成分的逐步逐一删除将这一活性成分从中筛选出来然后寻找其理想浓度[Ham,1984].当然,这是一项耗时而繁杂的工作,包括绘制细胞生长的生长曲线,每个阶段做克隆生长分析,找到一种适合新细胞类型的新培养基至少要三年时间.
由于种方法耗费时间长,使人们想到了第二种方法:对现在培养基,如RP-MI1640或DMEM与Ham’s F12的联合培养基加以补充,而且将加入成分的种类限制在一个较小的范围内,仅包括硒,转铁蛋白,白蛋白,胰岛素,氢化可di松,雌激素,三磺甲状腺氨酸,乙醇胺,磷酸乙醇胺,生长因子(EGF,FGF,PDGF,内皮生长添加物等),前列腺素和其他有特殊功能的物质.通常对多数细胞而言,硒,转铁蛋白,胰岛素都很重要,但对其他成分的需求则差别较大.
