CCK-8试剂盒产品用途

　　用于药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验。

　　CCK-8试剂盒基本原理

　　该试剂中含有 WST-8【化学名：2-（2-甲氧基-4-硝基苯基）-3-（4-硝基苯基）-5-（2,4-二磺酸苯）-2 H-四唑单钠盐】，它在电子载体 1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓*（1-Methoxy PMS）的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲臜产物（Formazan dye）。生成的甲臜物的数量与活细胞的数量成正比。因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。

　　CCK-8试剂盒的使用及保存方法分享

　　1. 未开封的试剂盒：所有试剂均按试剂瓶标签上所示保存。请注意，收到试剂盒后请尽快将TMB 洗涤液，终止液保存于4℃，其他试剂保存于-20℃。

　　2. 使用后的试剂盒：剩余试剂仍需按照试剂瓶标签所示的温度保存，开封后的酶标板要加干燥剂后密封保存于-20℃，避免潮湿。

　　注意：

　　试剂盒内酶标条可拆卸，按实验需求可分多次使用;使用后的剩余试剂盒建议在*实验后 1个月内使用完毕。产品过期时间以盒子上的标签为准，保质期内所有组分都确保是稳定的。

　　标本的采集与保存

　　1. 血清：

　　将收集于血清分离管的全血标本在室温放置 2 小时或 4oC 过夜，然后 1000×g 离心 20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20oC 或-80oC 保存，但应避免反复冻融。

　　2. 血浆：

　　用 EDTA 或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的 30 分钟内于 2-8oC 1000×g 离心 15 分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20oC或-80oC 保存，但应避免反复冻融。

　　3. 组织匀浆：

　　1) 取适量组织块，于预冷PBS(0.01mol/L, pH 7.0-7.2)中清洗去除血液，称重后备用(组织块较大需先剪碎后再匀浆);

　　2) 可同时选用多种匀浆方法达到较好的破碎效果：首先将组织块移入玻璃匀浆器，加入5-10mL 预冷PBS 进行充分研磨，该过程需在冰上进行(有条件实验室可选用机器匀浆);得到的匀浆液可再利用超声破碎或反复冻融 进一步处理(超声破碎过程中注意冰浴降温;反复冻融法可重复2次)。

　　3) 将制备好的匀浆液于5000×g 离心5 分钟，留取上清即可检测。