植物总酚检测试剂盒说明书

分光光度法

产品内容：

提取液：60%乙醇，自备。

试剂一：液体6mL×1 瓶，4℃保存。

试剂二：液体15mL×1 瓶，4℃保存。

产品说明：

植物酚类物质具有清除自由基，抗氧化抗衰老的作用，具有较高的营养价值和医疗保健作用而广泛应用于化妆品、食品、医药等领域。

在碱性条件下，酚类物质将钨钼酸还原，产生蓝色化合物，在760nm 处有特征吸收峰，测760nm 处的吸光值，即可得样品总酚含量。

仪器设备（自备）：

烘箱、粉碎仪、40目筛、超声破碎仪、60%乙醇、离心机、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿。

操作步骤：

• 总酚提取： 

将样本烘干至恒重，粉碎，过40目筛之后，称取约0.1g，加入2.5mL提取液，用超声提取法进行提取，超声功率300W，破碎5秒，间歇8秒，60℃，提取30min。12000rpm，25℃，离心10min，取上清，用提取液定容至2.5mL，待测。

 2、测定操作表：

计算公式：

标准曲线：y=5.615x+0.0012，R²=0.9994

总酚含量（mg/g组织）=(ΔA₇₆₀-0.0012) ÷5.615×V反总÷（V样÷V样总×W）=8.905×(ΔA₇₆₀-0.0012) ÷W

V 样总：加入提取液体体积，2.5mL；V反总：反应总体积，1mL；V 样：反应中样品体，0.05mL；W：样品质量，g。

注意事项：

• OD 值大于0.8，样品适当稀释再测定，注意计算公式里乘以稀释倍数。
• 试剂一对皮肤有一定的刺激性，请操作时做好防护措施。

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