CCK-8试剂盒中含有WST–8：化学名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐，它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪 *（1-Methoxy PMS）的作用下被细胞线粒体中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲臜产物（Formazan），生成的甲臜物的数量与活细胞的数量成正比。用酶联免疫检测仪在450nm波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。该方法已被广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞增殖试验、细胞毒性试验以及药敏试验等。

　　CCK-8试剂盒操作较繁杂,在操作中应留神以下5个方面：

　　1. 跟着病况的进展或由其他因素影响，某些抗体在机体内的含量发作大幅动摇，因此有必要对标本进行预处理。间接法测定中，标本恰当稀释还可下降非特异性反响。

　　2. 加样一般运用加液器，在CCK-8试剂盒中一般有4次加样：加标本、加酶结合物、加底物和加间断液。加标本时有必要每份标本运用一支移液器吸嘴，避免交叉污染。加酶结合物、底物和间断液时则不需更换吸嘴。

　　3.在成批手艺检测中，还应留神操作时差的影响。加样及混匀时间的差异，使抗原抗体反响和酶促反响时间不一致，对竞争法及定量检测影响很大，不留神可能会导致过错效果或定量不准。

　　4. 洗刷是CCK-8试剂盒操作过程中决议实验胜败的一个关键步骤。目的是除掉未结合的免疫反响物，间断抗原抗体反响，除掉标本中与反响无关的成分、游离的酶标物以及反响过程中吸附于固相载体上的非特异性物质。

　　5. 断定效果须运用CCK-8试剂盒测读仪，比色法判读可选择单波长或双波长，根据反响液颜色的不同选用不同波长的滤光片，以空白孔校零测定反响孔的吸光度值。酶标仪具有杰出的重复性。