上海丰翔生物科技有限公司是国内免疫学产品主要供应商之一，提供各种原装、分装检测ELISA试剂盒,质优价廉.我们均有具有丰富服务经验和深厚专业背景的人员团队为您提供技术服务和支持,有任何试剂盒方面的问题都能帮您解决,免除您的后顾之忧。并可以免费代检测，让您的实验省时省力，更好的为您服务。如有其他问题请及时。                                                                                                        
产品名称：大鼠C肽（C-P）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书

规格：原装/96T 分装 48T/96T

本试剂盒用于测定大鼠血清，血浆及相关液体样本中C肽（C-P）含量。

标本处理及要求 

1．血清、血浆标本可直接测定；

2．尿液、脑脊液、腹腔液：2000-3000转/分离心10分钟后，取上清液待测。

3．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

4．采集后尽早进行实验，若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。

试剂盒组成

自备物品

1 、 37 ℃ 恒温箱

2 、 标准规格酶标仪

3 、 精密移液器及一次性吸头

4 、 蒸馏水

5 、 一次性试管

6 、 吸水纸

操作步骤

1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔 10 孔，在*、第二孔中分别加标

准品 100μl，然后在*、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从*孔、第二

孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，

混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔

中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各

取 50μl 分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液 50μl，混

匀后从第七、第八孔中分别取 50μl 加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准

品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，

浓度分别为180ng/L，120ng/L ，60ng/L，30ng/L， 15ng/L）。

2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样

品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样

品zui终稀释度为 5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混

匀。

3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。     

4. 配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用

5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此

重复 5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7. 温育：操作同 3。

8. 洗涤：操作同 5。

9. 显色：每孔先加入显色剂 A50μl，再加入显色剂 B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色

15 分钟.

10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止

液后 15分钟以内进行。

计算

    以标准物的浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的

OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标

准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，

即为样品的实际浓度。

注意事项

1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

4． 请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔*孔OD值的），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请zui后乘以总稀释倍数（×n×5）。

5． 严格按说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

6．本试剂不同批号组分不得混用。

7．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9．底物请避光保存。

检测范围：

7.5ng/L -250ng/L

保存条件及有效期

1．试剂盒保存：；2-8℃。

2．有效期：6个月