在ELISA中，进行各项实验条件的选择是很重要的，其中包括：

　　固相载体的选择：许多物质可作为固相载体，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体，在使用前均可进行筛选：用等量抗原包被，在同一实验条件下进行反应，观察其显色反应是否均一性，据此判明其吸附性能是否良好。

　　包被抗体（或抗原）的选择：将抗体（或抗原）吸附在固相载体表面时，要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0～9.6之间。吸附温度，时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18～24小时。蛋白质包被的适浓度需进行滴定：即用不同的蛋白质浓度（0.1、1.0和10μg／ml等）进行包被后，在其它试验条件相同时，观察阳性标本的OD值。选择OD值大而蛋白量少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1～10μg／ml。

　　为了确保实验的成功，ELISA试剂盒实验中需留心下列的细节

　　1、严格按照规定的时刻和温度进行温育以保证成果。一切试剂都必须在运用前到达室温20-25℃。运用后当即冷藏保存试剂。

　　2、洗板不正确能够导致不的成果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔枯燥掉。

　　3、消除板底残留的液体和手指印，否则影响OD值。

　　4、底物显色液应呈无色或很浅的色彩，现已变蓝的底物液不能运用。

　　5、防止试剂和标本的穿插污染以免形成错误成果。

　　6、在储存和温育时防止强光直接照射。

　　7、平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。

　　8、任何反响试剂不能触摸漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会损坏试剂盒中反响试剂的生物活性。

　　9、不能运用过期产品。

　　10、假如可能传播疾病，一切的样品都应管理好，按照规定的程序处理样品和检测设备。