酶联免疫测定标准化的难点在于蛋白的不均一性、基质效应、交叉反应以及需要测定接近测定方法下限的浓度等，所测定的免疫反应性通常是在糖基化、降解和复合形式上有差异的蛋白同种型的混合体。

　　操作步骤：

　　1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

　　16pg/ml  5号标准品  150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液

　　8pg/ml   4号标准品  150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液

　　4pg/ml   3号标准品  150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液

　　2pg/ml   2号标准品  150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液

　　1pg/ml   1号标准品  150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

　　加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，