ELISAS实验抗原的摄取

（1） 抗原的摄取  任何血清学试验都依赖于具有价、特异性强的抗血清的产生，而抗血清的制备离不开抗原的收集、保存和提取。采回的害虫饥饿24h后，将等体积的磷酸缓冲液（PBS）滴入备用的害虫中，研磨后加入过量的PBS（PH=7.4）,在4℃下搅拌24h,然后以4000-5000r/min的速度离心20h,分离上清液。沉渣用上法重复抽提一次。

将两次所得的上清液混合后，置于4℃下更换多次冷盐水透析24h或48h。透析液用冰冻干燥法或反透析法进行浓缩。浓缩液用紫外分光光度计测定蛋白质含量，得到适当浓度的蛋白质溶液即位抗原。

  抽提过程中应注意：①所有的处理都需在低温（4℃）下进行，以防蛋白质变性：②若抗原溶液需保存较长的时间，则需加防腐剂（如NaN3）或在冻干状态下保存：③为制备特异性强的抗血清，抗原可用标准的生化技术进行纯化：④如一次不能收集足够的抗原，可将每次的虫体保存在-20℃或将抗原冻干直到积累足够的量。